[科普中国]-美蓝还原实验

原理

美兰还原试验是用来判断原料乳新鲜程度的一种色素还原试验。新鲜乳加入亚甲基兰后染为蓝色。如污染大量微生物产生还原酶使颜色逐渐变浅，直至无色，通过测定颜色变化时间，间接推断出鲜奶的卫生质量。1

试剂亚甲基蓝水溶液， 0.01g/300 ml2

仪器试管，20 mm×200 mm

水浴锅：可恒温到38℃2

步骤1. 吸取10 ml牛奶于灭菌试管中，在水浴中加热到38 ℃，再加入亚甲基蓝溶液1 ml，混匀；

2. 将试管放入水浴中，每30 min观察一次褪色情况，并记录每个样品褪色时间2。

结果评估通过溶液的褪色时间可以估算出牛奶中细菌总数。

影响因素细菌的活性由于原奶在实验前冷藏时间的延长，传统的适温菌型（产酸菌的牛奶菌丝），逐渐转换为嗜冷菌型（分解蛋白质和脂肪的菌丝），脱色时间和细菌总数之间的相关性变弱。

溶液的褪色时间与染色液的浓度有关可检验异常乳此方法对体细胞（白细胞）及其他细胞的还原作用也敏感，因此还可检验异常乳（乳房炎及初乳或末乳）。

褪色时间相当每ml牛乳中的细菌总数20 min >2×107

20-40 min 1.0×107—2.0×107

40 min-1 h 5.0×106—1.0×107

1 h-2 h 4.0×106—5.0×106

2 h-3 h3.0×106—4.0×106

3 h-4 h2.0×106—3.0×106

4 h-5 h 1.0×106—2.0×106

5 h-5.5 h 5.0×105—1.0×106

5.5 h-6.5 h3.0×105—5.0×105

6.5 h-7.5 h1.0×105—3.0×105

>7.5 h