吸印杂交技术的应用,逐步从DNA扩展到包括RNA和蛋白质转移杂交在内的更加广泛的研究领域。但由于RNA分子不能同硝酸纤维素滤膜结合,所以索森技术不能直接地应用于RNA的吸引转移。1979年阿尔温发现,将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性滤纸上,通过共价交联作用可永久地结合在一起。
简介吸印杂交技术的应用,逐步从DNA扩展到包括RNA和蛋白质转移杂交在内的更加广泛的研究领域。但由于RNA分子不能同硝酸纤维素滤膜结合,所以索森技术不能直接地应用于RNA的吸引转移。1
发展1979年阿尔温发现,将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性滤纸上,通过共价交联作用可永久地结合在一起。这种方法同索森的DNA吸印技术十分类似,所以称诺森RNA吸印技术。1
特点RNA分子同活性滤纸共价结合得十分牢固,但可以通过在杂种核酸分子呈不稳定状态的温度条件下漂洗杂交滤纸的办法,洗脱上次杂交反应中同RNA分子同源结合的放射性探针分子。因此,这一类吸印转移的滤纸可以多次反复使用。活性滤纸不仅能同RNA分子牢固地结合,而且能相当有效地结合变性的DNA分子。事实上叠氮化的活性滤纸,比硝酸纤维素滤膜能更有效地转移并结合小片段DNA,最近还发现,在适当条件下,硝酸纤维素滤膜能直接吸印RNA。1
本词条内容贡献者为:
胡芳碧 - 副教授 - 西南大学